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CTC+ PCR
CTC分离和富集
结果分析
细胞裂解，提取核酸（DNA或者mRNA)
qPCR，ddPCR
根据PCR仪配套软件，进行分析
核酸试剂盒提取流出液中的核酸分子
设计引物，进行扩增
循环肿瘤细胞分选仪
案例应用：

临床试验：


目的： 通过检测黑色素瘤患者的CTC mRNA生物标志物，可否用于转移黑色素瘤患者进行免疫检查点抑制剂疗效评估。
入组患者：56例黑色素瘤 III/IV期，计划接受免疫治疗（ipilimumab，nivolumab，pembrolizumab）的患者。

检测分子： CTC的 mRNA 生物标志物——MART1，TRP2，MAGEA3，PAX和GALNCT。


试验方案：


1.治疗前，分离CTC，进行mRNA生物标志物检测（cutoff≥ 2 mRNA分子）；
2.免疫治疗后，定期采血，进行CTC mRNA生物标志物检测，通过PFS， OS等评估CTC mRNA生物标志物与疗效的关系。同时，分离IV期患者的CTC进行成球培养和RNA测序。
结论：临床试验进行中，数据待发表。
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